Q:赛百盛对本公司的产品是如何监控的?
A :所有合成肽都经过HPLC和MS分析,除MALDIMS 外,由于肽在不同的质谱仪中,能按其本身的序列进行离子化,我们可以运用HPLC-MS技术对HPLC中那些离子化的峰进行分析。我公司的技术装备[MALDI-MS,HPLC-(ESI)MS(离子阱和四极管阵列)]为分析提供可靠的保证。
Q:什么样的保存条件是最好的?多肽的稳定性怎样?
A:多肽冻干后呈绒毛状或絮状粉末,可避免多肽的过早降解。建议贮存条件为: a. -20℃贮存或者在干燥环境中贮存 b. 尽量避免反复冻融 c. 尽量避免以溶液状态贮存(为使用方便可以将冻干粉分装后贮存) d. 如果必须以溶液状态贮存,建议用无菌水在弱酸性条件下溶解多肽并于-20℃贮存.
Q:如何确定肽已成环?
A :我们用Ellman反应来检测成环反应是否完全。如果Ellman检测结果为阳性(黄色),说明成环反应不完全;如果检测结果为阴性(不是黄色),说明成环反应已进行完全。我们对客户不提供环化鉴定的分析报告,一般在QC报告单中会有关于Ellman检测结果的描述。
Q:含有Cys的多肽在出货前经过还原了吗?
A :如果没有发现肽已经被氧化,我们一般不对Cys 进行还原。所有的多肽都是由粗品在pH2条件下纯化、冻干后得到的,这样的pH条件至少在某种程度上防止了Cys的氧化。含Cys的肽一般在pH2条件下进行纯化,除非有特殊原因需要在pH6.8条件下纯化。如果纯化在pH6.8进行,纯化产物必须马上用酸处理以防氧化。在最后的质量控制环节,对于含有Cys的肽,如果MS 图谱上发现有分子量为(2P+H)的物质存在,说明已形成二聚体。如果MS和HPLC都没有问题,我们就直接冻干后出货,无须再做任何处理。需要指明的是,含有Cys的肽随着时间的推移会发生缓慢的氧化,氧化程度主要取决于肽序列及贮存条件。